Gel Filtration

ゲルろ過 PhyTip^®カラムは、ピペット・チップにレジンを搭載したユニークな SEC（Size Exclusion Chromatography）です。レジンは上下のスクリーンに挟まれているので、漏れだし失うことはありません。スクリーンの素材は親水性のため、少量のバッファーで全体をカバーするため、貴重なサンプルの「ロス」を抑えられます。

ゲルろ過 PhyTip カラムでは、塩などの小分子はレジンの「小さな穴」に入りこみ、通過するのに時間がかかるため、ゆっくりとカラムから溶出されます。一方で抗体などのより大きな分子は、そこに侵入できないため、カラムから速やかに溶出されます。

このユニークなピペット・チップ型のゲルろ過 PhyTip カラムを利用することで、迅速にかつ正確に 95%以上の塩を除去するだけでなく、80%以上のタンパク質の回収に成功しました。

抗体の凝集は、抗体医薬の安全性における重大な問題のひとつです。この問題をクリアするため、研究者は異なる条件や多岐にわたる手法で医薬の安全性を分析評価します。毒性のある塩を取り除くバッファーの置換などの前処理には、多大なる時間と労力を必要とします。

そこで、ゲルろ過 PhyTip カラムと電動ピペットを組みあわせることで、12サンプルを約30分、96サンプルを約3時間で処理できます。さらにゲルろ過 PhyTip カラムは、ピペット・チップ型のため8、12 や 96 チャンネル・ ヘッドを備えもつ各社のリキッド・ハンドラーとの相性が良く、自動化 High-throughput に対応しますので、迅速かつ正確な前処理を必要とする研究員の頼もしい味方となるでしょう。

ゲルろ過 PhyTip カラムを利用することで、サンプル前処理の手間と時間を減らし、毒性試験などの分析評価へスムーズに駒をすすめることができるでしょう。

1. 95% 以上の塩を除去、80% 以上のタンパク質の回収率
2. 自動化 High-throughput への対応
3. 上から下への自由落下（吸引・吐出ではない）
4. 抗体やタンパク質の機能を損なわず分離
5. 高い再現性（少ないサンプル間のバラつき；10% 以下の CV）

[ 条件 ]

1. ゲルろ過 PhyTip カラム（1 mLチップに 200 µL の 5K レジンを搭載）
2. IgG（2 mg/mL）
3. PBS（カラムの平衡化とチェイサー）

[ 実験手順 ]

1. PBS でゲルろ過 PhyTip カラムを平衡化
2. 40 µLのIgG（2 mg/mL）をカラムへ注入
3. チェイサーとして130 µL の PBS をカラムへ注入
4. サンプルの回収

[ 条件 ]

1. ゲルろ過 PhyTip カラム（1 mL チップに 600 µL の 5K レジンを搭載）
2. Myoglobin（16.7 KDa; 茶色）
3. DNP-glutamate（313 Da; 黄色）
4. PBS（カラムの平衡化とチェイサー）

[ 実験手順 ]

1. PBS でゲルろ過 PhyTip カラムを平衡化
2. 200 µL のサンプル溶液（Myoglobin + DNP-glutamate の mixture）をカラムへ注入
3. チェイサーとして100 µL の PBS をカラムへ注入
4. 2-3 分おきにサンプルをチューブに回収