PeptiPEC-96

キット内容

Biotage® PeptiPEC-96 High-Throughput Kit には、以下の内容が含まれます。

• 活性化フィルター材料を充填した PECフィルタープレート（96ウェル）
• PEC-Linker RC+
• Buffer salt（クエン酸および炭酸ナトリウム混合物）
• ブロッキング剤（L-システイン）
• 還元剤（ジチオスレイトール：DTT）
• TFA回収プレート（96ウェル）
• ペプチド回収プレート（96ウェル）

PeptiPEC-96 精製テクノロジー

Biotage® PeptiPEC-96 は、PurePep® EasyClean（PEC™）キャッチ＆リリース技術により、化学合成ペプチドの効率的な精製を可能にします。
還元反応で切断可能なリンカー（PEC-Linker RC+）とアルデヒド修飾アガロースビーズからなる活性化フィルター材料を用いて目的ペプチドを選択的に捕捉し、合成由来の不純物を除去した後、穏やかな条件で目的ペプチドを回収します。

精製プロセスは以下のステップで構成されます。

1. リンカー結合（Linker coupling）

ペプチドは、Fmoc 固相ペプチド合成（SPPS）法により合成されます。各アミノ酸カップリング後にはキャッピング工程を行　　い、伸長不足の配列の生成を最小限に抑えます。ペプチド鎖の合成完了後、PEC-Linker RC+ をペプチドの N 末端 に結合させます。このリンカーは精製工程において目的ペプチドを捕捉するためのハンドルとして機能します。
この合成ステップは、Biotage® Syro I および Biotage® Syro II 並列ペプチド合成装置を用いて実施できます。

 

2. TFA切断（TFA cleavage）

トリフルオロ酢酸（TFA）を用いて、SPPS樹脂からペプチドを切り出します。
この工程により、以下を含む粗ペプチド混合物が得られます。

• • 目的ペプチド
  • 伸長しなかったペプチド
  • 欠損ペプチド
  • その他の合成由来不純物

SyroアクセサリであるTrasfer Unitを使用することで、ペプチド溶液を直接 96ウェルプレート にろ過回収でき、粗ペプチドを効率的に回収できます。

 

3. 溶解（Dissolution）

精製前に粗ペプチドを溶解します。
その後の精製工程は Biotage® Extrahera™ ワークステーション上で実行され、自動化されたハイスループット処理が可能になります。

 

4. 捕捉（Catch）

PEC-Linkerでタグ付けされたペプチドは、PeptiPECプレート内の活性化フィルター材料に共有結合的に捕捉されます。リンカーを持たない不純物は結合せず、次の洗浄ステップで除去されます。

 

5. 洗浄（Wash）

結合していない不純物（伸長不足の配列、欠損配列、その他の合成副生成物）を洗い流します。この工程により、目的ペプチドのみが固相担体に結合した状態で残ります。

 

6. 放出（Release）

PECリンカーは化学的に切断されます（中性条件での還元処理の後、酸処理を実施）。これにより、精製されたペプチドが固相担体から放出されます。最終的に、高純度のペプチドが得られ、各種アッセイなどのダウンストリーム（臨床・治療など）解析に使用できます。